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      1. T-2毒素對肉仔雞生長性能影響及益康脫毒劑作用效果

        時間:2020-06-15    點擊:11777


        孫鋁輝1  劉強2

        1 華中農業大學動物科學學院  2 南京農業大學動物科學學院


        摘要: 本研究的目的旨在評估益康脫毒劑對T-2毒素引起的肉仔雞生產性能下降的改善效果。選擇96只體重接近,健康1日齡肉仔雞(公雞),隨機分為4個處理組,每組4個重復,每個重復6只。對照組飼喂基礎日糧,試驗1組飼喂基礎日糧+6mg/kg T-2毒素,試驗2組飼喂基礎日糧+6mg/kg T-2毒素+0.05%益康,試驗3組飼喂基礎日糧+0.05%益康,飼養兩周。試驗結果表明:糧中添加6mg/kg的T-2毒素顯降低了肉雞的生產性能(P<0.05)、降低了肉雞對CP、Ca及P的表觀代謝率(P<0.05),誘導了肉雞肝臟損傷、誘導肉雞肌胃、十二指腸、空腸及回腸組織發生病變;日糧中添加0.05%的益康脫毒劑產品可有效緩解T-2毒素對肉雞生產性能、表觀代謝率、肝臟及胃腸道的損傷;同時,日糧中單獨添加益康脫毒劑產品對肉雞生產性能無顯著影響。


        關鍵詞:霉菌毒素脫毒劑益康;T-2毒素;肉仔雞

        單端孢霉烯族毒素是真菌次生代謝產物,主要由鐮刀菌、木霉菌和真菌菌種產生。T-2毒素是單端孢霉烯族毒素中檢測到的毒性最強的霉菌毒素。世界范圍內的谷物和動物飼料中都檢測到T-2毒素。以往的報告顯示,約20%至70%的歐洲谷類樣本,包括玉米、大麥和小麥,含有T-2毒素。T-2毒素可迅速被腸道吸收,進而嚴重損害動物的各種器官,尤其是肝臟和消化系統。研究表明,采食含有T-2毒素的日糧,會減少小鼠、肉雞和豬的采食量和體重增加。此外,許多研究認為T-2毒素影響器官的相對重量、血清生化指標、抑制蛋白質合成、細胞凋亡以及免疫功能的抑制。因此,在過去的幾十年中,研究有效地減少T-2毒性方法引起了人們的極大興趣。

        一般來說,有幾種方法可以減少 T-2毒素的有害影響,包括物理、化學和生物方法。輻照提供強烈的能量來分解谷物中的 T-2毒素 ,強堿性溶液能抑制 T-2毒素的生物活性。此外,酶處理也可以降解 T-2毒素,破壞其12,13-環氧化物環。然而,從飼料和食物中去除 T-2毒素的方法可能不穩定且昂貴,并可能進一步影響谷物品質。物理吸附通過抑制腸粘膜對霉菌毒素的吸收而更有效和更直接地去除毒素,但缺乏有效的吸附劑來吸附 T-2毒素和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇。以往的研究報告,吸附劑含有鋁硅酸鹽,如膨潤土,蒙脫石,沸石,在動物試驗和養殖中可有效防止玉米赤霉烯酮,黃曲霉毒素 b1Afb1) ,伏馬菌素 b1(Fb1)引起的損失。水合硅鋁酸鈣(hscas)是一種由天然沸石礦石制成的物質,經過粉碎、篩選和高溫處理后得到凈化,使結構得以增加其大小、表面積和吸附容積。益康是一種霉菌毒素吸附劑,主要含有 hscas,其表面經十六烷基吡啶氯化銨改性,并插入-葡聚糖。改性的 hscas 吸附劑增加了比表面積,可以增加對霉菌毒素的吸附,避免對飼料中營養物質的吸附。本研究旨在探討益康對T-2毒素毒性的改善作用。


        1 試驗材料與方法 

        1.1 試驗動物與飼養方式

        選擇96只體重相近,1日齡的健康Cobb-500公肉仔雞隨機分為4組,每組4個重復,每個重復6只。自由采食與飲水。對照組飼喂基礎日糧(NRC,1994),試驗1組飼喂基礎日糧+6mg/kg T-2毒素,試驗2組飼喂基礎日糧+6mg/kg T-2毒素+0.05%益康,試驗3組飼喂基礎日糧+0.05%益康。受T-2毒素污染的飼糧是通過蒸汽溶液制成的。簡單地說,150毫克T-2毒素溶于50毫升乙醇中,然后與500克玉米混合;旌蠘悠冯S后在65℃ 的烤箱中烘干,用于制作T-2毒素污染的飼糧。每天監測肉仔雞的死亡率,并測量采食量和體重。14d測定雛雞總能量、粗蛋白質、鈣和總磷的代謝率。實驗持續兩周。在實驗結束時,每個試驗組的8只雞被處死,收集血液和小腸十二指腸、空腸和回腸,進行血清學和腸道組織學檢查。

        表1 試驗日齡組成和營養成分


        1.2 血液生理指標和組織學檢測

        血清在1000轉,4℃,離心10min制備。用全自動生化分析儀(beckman synchron cx4 pro,ca,usa)測定血清中alt 和ast 的活性,以及 tp 和 alb 的濃度。取十二指腸、空腸和回腸(n= 4/組) , 用10% 福爾馬林中性緩沖液固定,石蠟包埋,5μm 切片,蘇木精-伊紅染色,組織病理學檢查。用光學顯微鏡檢查每只雛雞的腸組織,發現病變: 絨毛上皮細胞變性、壞死和脫落; 漿膜水腫、增厚,或兩者兼有。無、輕度、中度或強烈病變的切片分別給出0、1、2和3分。


        1.3 表觀代謝率

        測定和計算雛雞的總能量、粗蛋白質、鈣和總磷的表觀代謝率?偰芰糠治鍪褂媒^熱彈熱量計標準化(ika c2000)苯甲酸。分別采用高錳酸鹽滴定法990.03(aoac,2000)、比色法985.01(aoac,1990)和凱氏定氮法984.13(aoac,1990)測定鈣、總磷和粗蛋白。


        1.4 統計分析

        單因素方差分析被用來測試日糧效應的主要影響。如果有主要影響,則進行多重平均比較的 bonferroni t 檢驗。數據表示為平均±SD,顯著性水平設置為P<0.05。分析是用 spssstatistics 19.0軟件包進行。


          2  結果  

        2.1 生長性能

        生長性能結果見表2。四組間初始體重無顯著性差異(P>0.05,表2)。與對照組(group 1)相比,日糧中添加T-2組(group 2)在第1-7天、第8-14天和第1-14天的體重增長和采食量分別下降15.3%-31.8% 和12.4%-20.6%,而在第8-14天和第1-14天的采食量分別增加11.4%-15.9% (P<0.05)。雖然日糧中添加益康 (group 3)并不能減輕T-2毒素誘導的(group 2)對第1-7體重增長和采食量的不利影響,但在第8-14天和第1-14天,添加益康(group 3)可減輕T-2毒素誘導的(group 2)對體重增長和采食量的不利影響,分別為38.6%-46.6% 和33.0%-36.0%。同時,飼料中添加益康 (group 3)可減輕 T-2毒素(group 2)引起的料肉比下降。值得注意的是,在整個試驗過程中,與對照組(group 1)相比,單獨添加飼料添加益康(group 4)并不影響(P>0.05)體重增加、采食量和料肉比。值得注意的是,每種處理的生長性能變化很小,這表明在目前的研究中,每種處理的四個重復的結果是可靠的。

        表2 T-2毒素和益康對肉仔雞生長性能的影響

        2.2 表觀消化率

        營養新陳代謝率的結果如表2所示。日糧中添加T-2毒素(group 2)對表觀消化能無影響(P>0.05) ,但粗蛋白、鈣和總磷的表觀代謝率分別下降了14.9%、18.0% 和16.1% (P<0.05)。與對照組(group 1)相比,添加益康(group 3)可以顯著減輕T-2毒素誘導的粗蛋白和總磷表觀代謝率的變化。此外,與對照組(group 1)相比,日糧添加益康 (group 4)對總能量、粗蛋白、鈣和總磷的表觀代謝率沒有影響(P>0.05)。

        表3 T-2毒素和益康對8-14日齡肉仔雞表觀代謝能、粗蛋白、鈣和總磷的消化吸收率的影響


        2.3 血清生理和組織病理學

        血清生化結果見表3。試驗2周后,T-2毒素(group 2)對血清谷丙轉氨酶(alt)、總蛋白(tp)、白蛋白(alb)無影響,但與對照組(group 1)相比,谷草轉氨酶(ast)(17.7%)升高(P<0.05)。顯著地,這種變化被日糧添加益康 (group 3)所抑制。與對照組(group 1)相比,單獨日糧添加益康(group 4)不影響(P<0.05)這些血清生化指標。此外,組織學結果表明,日糧中T-2毒素誘導腸道損傷(圖1)。特別是,與對照組(group 1)相比,T-2毒素組(group 2)引起絨毛上皮細胞嚴重變性、壞死和脫落,腸粘膜炎性細胞增多,腸道充血,腸杯狀細胞增生,漿膜水腫和增厚,多數淋巴樣細胞浸潤于十二指腸(圖1a)、空腸(圖1b)和回腸(圖1c)。有趣的是日糧補充益康(group 3)可以防止 T-2毒素引起的小腸損傷(group 2)。相反,單獨補充益康對腸道形態沒有影響(group 4)。

        表4 T-2毒素和益康對14日齡肉仔雞血清生理的影響





          3 討論  

        研究表明,霉菌毒素脫毒劑益康能有效對抗T-2毒素對肉雞的不良影響。雛雞攝入T-2毒素會減少體重、采食量和飼料轉化率,這與以前的研究一致。本研究進一步證明,T-2毒素誘導的肉仔雞生長性能低下與雛雞粗蛋白、鈣和總磷代謝率下降有關。這些結果類似于先前的研究,表明鐮刀菌毒素可以負面影響雞營養物質的消化率。本研究表明,日糧補充0.05% 益康成功地減少了T-2毒素的負面影響。試驗組和對照組肉雞在這些生產性能指標上均未發現不良反應,說明添加益康對肉雞是無毒、安全的。

        小腸,包括十二指腸、空腸和回腸,是大多數營養物質消化和吸收的主要部分。本研究的病理學結果表明,T-2毒素對肉仔雞的小腸有嚴重的損傷作用,這些結果與前人的研究結果一致,即T-2毒素可引起肉仔雞的腸道損傷,從而降低營養物質的利用效率。而本研究表明,T-2毒素引起的小腸損傷可以通過補充霉菌毒素脫毒劑——益康得到緩解。此外,與對照組相比,單獨添加T-2毒素可增加ast 活性。血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的活性,血清白蛋白和總蛋白的濃度,已被描述為肝功能和損傷的有價值的參數[。這些結果與先前的研究相似,為這些研究提供了證據,證明T-2毒素在雞身上引起肝損傷。然而,一些其他的報告表明T-2毒素不影響這些參數在家禽,豬,倉鼠。這種差異可以歸因于不同的實驗條件,包括暴露劑量,持續時間和動物種類。本研究結果表明,補充霉菌毒素脫毒劑益康可以改善血清生化指標的變化。綜上所述,這些結果與先前的研究結果一致,即T-2毒素引起的生長遲緩主要是由于誘導的腸道和肝臟損傷所致。但日糧中添加益康可以防止T-2毒素引起的生長不良,這與抑制腸道和肝臟損傷有關。

            HSCAS吸附劑是一種已被證明具有吸附黃曲霉毒素B1的有效飼料添加劑,而一般的HSCAS吸附劑不能有效地吸附單端孢霉烯族毒素如T-2毒素和嘔吐毒素。人工改性的沸石、葡甘聚糖、蒙脫石和硅藻土可以增強對霉菌毒素的吸附和解毒作用。為此,研制了一種改性HSCAS吸附劑產品——益康,以防止T-2毒素的毒性作用。以天然膨潤土為基礎,采用十六烷基吡啶氯化銨表面改性,再與酵母葡聚糖進行插層。改性劑取代特殊的膨潤土層間陽離子和水分子后,顆粒間距明顯增大,顆粒表面由親水性變為疏水性。因此,改性 HSCAS吸附劑具有較大的吸附容量和親脂疏水性,能有效地吸附飼料中的各種霉菌毒素。結果表明,改性HSCAS 吸附劑能有效防止T-2毒素對肉雞的不良影響。以往的研究表明,0.25%的吸附劑或2%的聚合葡甘聚糖可以減輕1.0-2.0 mg/kg T-2毒素的毒害作用。在日糧中添加0.05% 益康可以減輕6.0 mg/kg T-2毒素的負面影響,說明改性HSCAS吸附劑是非常有效的。同時,與前人的研究一致,改性HSCAS吸附劑——益康在當前的研究中并不影響營養物質的代謝速率和生長性能。



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